產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Poly-D-lysine Solution (5 mg/ml), Mw 150,000-300,000
聚D-賴氨酸(5 mg/ml),分子量:150,000-300,000 |
X13206-400ul | 400μl(2mg) |
238 |
產品描述
多聚賴氨酸(poly-lysine)是一種帶正電荷的氨基酸聚合物,能夠結合于DNA,紅細胞膜或任何帶負電荷蛋白,是一種非特異性的細胞粘附因子,促進細胞吸附到固相基質上。作用機理在于其可增強細胞膜表面的負電荷離子和固相基質表面(如細胞培養(yǎng)皿,載玻片等)的靜電相互作用。當吸附到培養(yǎng)表面后,多聚賴氨酸提高用于細胞結合的陽離子結合位點數。多聚賴氨酸分子量的大小與粘度相關,即分子量較低,粘度較低,使用越容易;分子量較高,粘度較高,提供的粘附位點也較多。分子量>30,000的聚賴氨酸適用于促進細胞粘附到固體基質。
多聚賴氨酸(poly-lysine)有兩種常見亞型,D-和L-型。由于多聚賴氨酸是細胞結合的非特異性粘附因子,兩種亞型都可用作包被固體基質,在細胞培養(yǎng)中都可促進細胞的貼壁生長。據報道多聚L-賴氨酸能夠改善蛋白在ELISA培養(yǎng)板上的粘附性。然而細胞應用中,某些細胞能夠水解多聚L-賴氨酸。此種情況必須使用多聚D-賴氨酸作為粘附因子,從而保護細胞不會因攝取過量L-賴氨酸而被破壞。
本品為無菌的多聚-D-賴氨酸(Poly-D-lysine)溶液,濃度為5mg/ml,分子量為150,000-300,000,可直接稀釋后用于細胞或組織培養(yǎng)相關的實驗。
保存與運輸方法
保存:?20°C保存,1年穩(wěn)定。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
1) 在某些細胞培養(yǎng)應用中,一些細胞會消化多聚 L-賴氨酸并吸收,攝入過多的多聚 L-賴氨酸會產生一定的細胞毒性。因此,遇到這種情況建議選用多聚 D-賴氨酸(Poly-D-lysine),如Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)。
2) 本品以氫溴酸(HBr)的形式提供,每個賴氨酸殘基約含一個HBr。HBr的存在使得多聚賴氨酸能溶于中性緩沖液,通過透析除去鹽離子。
3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 細胞培養(yǎng)用包被基質
使用多聚D-賴氨酸進行細胞相關包被實驗,需根據不同的細胞系和應用進行包被條件的優(yōu)化。一般步驟如下:
1)使用無菌組織培養(yǎng)級水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲存液稀釋到最適合自身實驗體系的包被濃度。通常情況下,常用的培養(yǎng)皿/板包被濃度為0.1mg/ml,即將儲存液稀釋50倍后使用。
2)無菌條件下包被細胞培養(yǎng)板,使用量0.5ml-1.0ml/25cm2。輕輕搖動板底以使其覆蓋整個板面
3)5min后,用槍移除培養(yǎng)板表面溶液,并用無菌組織培養(yǎng)級水或者PBS清洗板面;【注意】:有的情況需要1~2h來完成鋪板,有的時候需要過夜鋪板。依情況而定。
4)至少干燥2h后,方可進行細胞培養(yǎng)。
【注意】:如果多聚賴氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必須除菌,可用γ-射線照射(而非高壓滅菌)對其進行除菌。
【注意】:如果包被表面不平整,可用1mM醋酸鎂預處理玻璃載玻片2-3h,徹底清洗干凈后再開始包被?;蛘?,玻璃載玻片用酸清洗(鹽酸或硫酸),經此處理能讓多聚賴氨酸溶液包被很平整。
2. 組織學研究(玻片的包被)
使用無菌組織培養(yǎng)級水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲存液稀釋到最適合自身實驗體系的包被濃度,一般推薦0.1%(w/v)的poly-D-lysine溶液用于組織學玻片的制備。
將玻片用相應濃度的多聚賴氨酸溶液處理5min后,清洗玻片并將其室溫過夜干燥或者在約60℃的烤箱內烘干~1h?!咀⒁狻浚捍斯ぷ魅芤貉b在塑料瓶中于4℃保存,并限制使用次數在4次以內。