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產品說明：

產品描述

鏈霉蛋白酶E (Pronase E). 來源于灰色鏈霉菌的一組蛋白酶(Protease from Streptomyces griseus) ,至少包含細胞外絲氨酸蛋白醇在內的三種蛋白酶活性。通常情況，絲氨酸蛋白酶具廣譜的底物特異性，通過分子上一一個天冬氨酸，一個組氨酸，和一個絲氨酸組成的活性位點來調控。本酶選擇性偏好水解谷氨酸或天冬氨酸羧基形成的肽鍵，常見的絲氨酸活性位點抑制劑可抑制其活性，如PMSF和DFP。 鏈霉蛋白酶E (PronaseE) ，還至少包含三種酪蛋白水解活性和一種氨基肽酶活性，這種酪蛋白水解酶分別命名為灰色鏈霉菌來源蛋白酶A (Streptomyces gniseus Protase A)，蛋白酶B (Streptomyces griseus Protease B)和胰酶(Sreptomyces griseus TIrypsin)。

因此，本制品可用于蛋白的大量或者完全降解，還可用來研究蛋白酶抑制劑，以及熱失活動力學。本制品常用于核酸分離步驟，在添加0.2% SDS和10 mM EDTA的體系內孵育0.5-3h即可達到目的。因其比已知的堿性蛋白酶在更高pH環(huán)境下，甚至0.2N NaOH溶液中，活性更強，因此非常適合不溶性蛋白的酶解實驗，以及蛋白結構分析。另，還可與膠原酶和胰酶聯合使用，以消化組織。也可作用純化糖蛋白生產糖肽。

使用方法

[注意] :本品應用非常廣泛，具體的使用方法和工作濃度請根據實驗經驗或參考文獻來調整。

   1. 儲存液制備:溶解于去離子水，配制成5-20mg ml的儲存液，若用于DNA或RNA分離步驟，建議將溶液56°C加熱處理15min,之后37°C孵育1h, 此步驟能促使酶發(fā)生自消化，以去除DNase和RNase污染。 之后將儲存液分成單次用量，-20°C凍存， 通常情況1年穩(wěn)定。

   2. DNA分離:直接加入DNA制備體系(含有0.5-1% SDS以打破DNA-蛋白相互作用)，典型工作濃度范圍250-500μg蛋白/ml, 于37°C孵育1-4h。 [注意: 建議工作濃度范圍在250-2000g/ml,依照具體情況而定]。

   3.蛋白水解:溶解約0.2uM蛋白到0.2ml 50mM碳酸氫銨緩沖液，pH8.0 (或磷酸鹽緩沖液，pH7.0) ，之后按照1% (w/w)加入Pronase E,于37°C孵育24h。 根據情況，有可能需要添加4% (w/w)氨肽酶M，并于37°C再孵育18h。

注意事項：

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應用或其他用途。